黄曲霉素m1的检测方法是什么？高效液相色谱法的原理是什么？

黄曲霉毒素M1(AFM1)，是一种有机化合物，化学式为C17H12O7，主要用于新陈代谢和致癌性的研究。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，黄曲霉毒素M1在2B类致癌物清单中。

黄曲霉素m1的检测方法是什么?

(1)AFM1标准溶液的配制

用三氯甲烷配制10μg/mL的AFM1标准溶液，用紫外分光光度计在357nm波长AFM1标准溶液的准确浓度(AFM1的摩尔消光系数为19950)，避光4℃保存备用。

(2)样品提取

液体样品直接加入甲醇振荡过滤得提取液，固体样品粉碎过筛或研磨混匀后，用一定比例的甲醇水溶液振荡过滤得提取液。提取液可以先用石油醚和氯化钠溶液分配净化，再用三氯甲烷转相提取，氯化钠溶液水洗 ，无水硫酸钠脱水后，收集三氯甲烷层于65℃水浴通风挥干，最后用三氯甲烷将蒸发皿中残留物转移至浓缩管中，减压吹气法将此液浓缩至一定体积后备用。

(3)点样层析、展开、测定

各取10μL样品用浓缩液和标准液分别点于己在105℃活化2h的硅胶G薄层板上，置于加入一定量的展开剂的展析缸中展开，横展和纵展相结合，挥干后在紫外灯下观察并测量Rf值(一般AFM1的Rf值为0.34)，并与标准溶液的最低检出量(0.0004μg)的荧光强度相比较，同时用硫酸溶液(1:3)显色剂喷荧光点，进行确证试验，最后按样品称 量值、浓缩体积、总稀释倍数、标准溶液最低检出量进行计算。

高效液相色谱法的原理是什么?

用C18柱抽提纯化样品中的AFM1，乙醚对C18柱洗涤，再用CH2Cl2-乙醇洗脱AFM1，然后加入三氟乙酸(TFA)对AFM1进行衍生化处理，利用液相色谱荧光检测器检测，并与标准AFM1-TFA的衍生物比较，进行定性、定量分析。